实时荧光定量PCR（Real-time Fluorescent Quantitative PCR），简称qPCR，是一种在分子生物学领域广泛应用的技术。它通过实时监测反应过程中荧光信号的变化来实现对目标DNA或RNA的定量分析。这项技术不仅能够精确地检测样本中特定基因的表达水平，还能用于病原体的检测和遗传疾病的诊断。
qPCR的基本原理是利用特异性引物与模板DNA结合后，在热循环条件下进行扩增。每一轮扩增都会产生新的双链DNA片段，这些新生成的DNA会与预先加入反应体系中的荧光探针发生作用，释放出可被仪器检测到的荧光信号。通过对荧光强度随时间变化曲线的分析，可以计算出初始模板的数量以及扩增效率等重要参数。
与传统的终点法不同，qPCR可以在扩增过程中的任意时刻获取数据，并且具有更高的灵敏度和准确性。此外，由于整个实验过程都在封闭系统内完成，因此减少了污染的风险，提高了结果的可靠性。
为了确保实验结果的准确性，需要严格控制各种条件如试剂质量、仪器校准、操作规范等。同时，合理设计引物和探针序列对于获得理想的结果也至关重要。总之，实时荧光定量PCR以其高效、准确的特点成为了现代生命科学研究不可或缺的重要工具之一。
